Les analyses ne peuvent être réalisées dans n’importe quel laboratoire. Pour fournir un résultat fiable et dégager le gestionnaire de l’établissement de toute responsabilité, le laboratoire doit répondre à trois conditions (circulaire DGS du 22/04/2002) : 

La Drôme-laboratoires répond à ces trois conditions.

Le prélèvement 

Seul un prélèvement judicieux, effectué dans de bonnes conditions fournira un résultat interprétable : il doit être réalisé par un personnel compétent qui sait comment traquer la bactérie là où elle se réfugie.

Le laboratoire départemental d'analyses de la Drôme est accrédité pour le prélèvement par le COFRAC, organisme indépendant. Ses agents sont à même de réaliser un prélèvement fiable et qui pourra être interprété par le client et contrôlé par l’administration de la DDASS , la Direction Départementale des Affaires Sanitaires et Sociales.

Chaque installation sanitaire doit être évaluée et inspectée par un professionnel avant de procéder à l’échantillonnage.  

·         Eau chaude sanitaire :

Pour ces prélèvements, il n’est pas utile de flamber.

  ·         Tours aéroréfrigérantes :

Le prélèvement doit être effectué juste avant un traitement de chloration ou au moins 48h après, sur l’eau de ruissellement. A proximité de la tour, l’agent doit porter un masque de protection P3 destiné à le protéger des aérosols.

·         Fontaines décoratives, spas, jacuzzis, etc. :

L’eau est prélevée directement à l’aide d’un flacon stérile et d’une canne décontaminée.  

Le prélèvement est recueilli dans deux flacons de 500 ml pour les eaux chaudes sanitaires (un litre au total) et de un flacon pour les tours.

Les conditions de prélèvements et les caractéristiques de l’eau et de l’installation sont notées sur une fiche détaillée.

Le prélèvement est acheminé rapidement sous froid positif au laboratoire.

L’analyse 

La Légionelle exige des facteurs de croissance particuliers (cystéine, fer) Elle est mise en culture sur différents milieux spécifiques  pendant une durée longue avant d’être identifiées. La totalité des opérations dure, de façon incompressible, 10 jours au minimum. L’accréditation du laboratoire par le COFRAC apporte là encore la garantie de bonne exécution du travail de laboratoire .

En cas d’urgence, suite à une épidémie par exemple, une autre technique  normalisée mais plus rapide peut être mise en œuvre (fondée sur une technique dite PCR : Polymerase Chain Reaction). Le résultat est alors obtenu en 24 heures. 

La PCR est une technique aujourd’hui normalisée par l’afnor (NF T 90-471) qui permet la détection de l’ADN de légionelles présentes dans les eaux des réseaux sanitaires et des tours aéroréfrigérantes.

Cette technique se déroule en trois étapes bien précises :

-          L’extraction de l’ADN : les légionelles sont lysées pour pouvoir en extraire leur ADN

-          La purification de l’ADN : par de nombreux lavages, on obtient un ADN propre et exempt de tout inhibiteur

-          L’amplification : l’ADN est soumis à plusieurs phases de température qui correspondent à la dénaturation, à l’hybridation et à l’amplification proprement dite.

Les résultats

Un résultat en Legionella pneumophila inférieur à 1000 UFC/l (unités formant colonie par litre d’eau), constitue le seuil à partir duquel une intervention doit être déclenchée.

Ces résultats doivent être interprétés car l’échantillonnage, l’heure et le choix du point de prélèvement influencent énormément les résultats.

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Dernière modification : 11 décembre 2007